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豬瘟病毒抗體定量檢測試劑盒豬瘟病毒的流行病學(xué)特點(diǎn) 本病在自然情況下只感染豬,對不同性別、年齡、品種的家豬和野豬均有易感性。但免疫母豬所生仔豬30天后易感染性增強(qiáng)。斷奶后15-60天多發(fā),病程7-20天周達(dá)流行高峰。病豬是主要傳染源。病毒通過糞便、尿液及其他分泌物排出體外,污染飼料,飲水及周圍環(huán)境等,經(jīng)消化道而感染。本病的發(fā)生沒有季節(jié)性,新疫區(qū)呈急性暴發(fā),發(fā)病率和死亡率都高。老疫區(qū),豬群有一定的免疫力,長期呈慢性流行,如有細(xì)菌繼發(fā)感染則病情加重。近些年來在豬群中出現(xiàn)一種非典型豬瘟,或稱溫和型豬瘟,癥狀輕微,病變不典型,病死率達(dá)30%~50%。 防控措施 1、傳染源的阻斷 把關(guān)好引種步驟,加強(qiáng)外來豬的檢疫工作。 2、免疫過程的嚴(yán)格落實 嚴(yán)格把握好引進(jìn)疫苗的質(zhì)量,選擇免疫效果優(yōu)良的疫苗。 3、免疫監(jiān)測 建立完善的定期免疫監(jiān)測機(jī)制,根據(jù)監(jiān)測的結(jié)果科學(xué)合理的免疫,避免低質(zhì)量疫苗,以及豬繁殖與呼吸綜合征疾病導(dǎo)致的免疫失敗的產(chǎn)生,同時也可用以檢查緊急免疫的效果,避免重復(fù)接種
豬瘟病毒抗體水平監(jiān)測意義 仔豬豬瘟母源抗體是未進(jìn)行豬瘟超前免疫的初生仔豬獲得保護(hù)力的重要因素,其主要從初乳中獲得。母源抗體的存在,可使仔豬在一定時間內(nèi)被動地得到保護(hù),但又給免疫接種帶來影響。由于母源抗體對疫苗有中和、清除等作用,所以,若初免過早,會因母源抗體水平高,對疫苗產(chǎn)生中和作用導(dǎo)致免疫失。欢绻趺鈺r間過遲,又會因仔豬母源抗體水平過低而易受環(huán)境中豬瘟病毒的侵襲。因此了解豬瘟抗體動態(tài)水平是防治該病的關(guān)鍵。 豬瘟抗體水平檢測的主要方法主要包括病毒分離鑒定、分子生物學(xué)及血清學(xué)方法。 血清學(xué)抗體檢測方法操作簡單、高通量、價格低廉 中和試驗操作復(fù)雜、檢測周期較長、對試驗儀器與操作人員技術(shù)水平要求均較高,很難在基層推廣應(yīng)用; 間接血凝試驗(IHA)是我國豬瘟抗體檢測的經(jīng)典方法,在國內(nèi)得到了廣泛應(yīng)用,但該方法敏感性低,待測血清樣品需經(jīng)滅活處理,增加了檢測時間和檢測難度,且血清的質(zhì)量嚴(yán)重影響檢測結(jié)果,誤差較大,不適合準(zhǔn)確檢測豬瘟抗體水平。 間接ELISA與阻斷ELISA具有微量、敏感、特異、高通量的優(yōu)點(diǎn),可用于豬瘟抗體水平監(jiān)測,但其需要酶標(biāo)儀等儀器設(shè)備,且操作人員需有一定的專業(yè)技術(shù)水平,適合具有基本試驗條件的基層實驗室; 斑點(diǎn) ELISA(Dot-ELISA)與膠體金免疫方法無需特殊儀器設(shè)備、操作簡便、檢測時間短,但檢測結(jié)果無法定量,不能動態(tài)的監(jiān)測群體抗體水平。 RT-PCR檢測方法的敏感性高,在許多實驗室這兩種方法已經(jīng)成為常規(guī)的檢測CSFV的方法。RT-PCR檢測方法盡管敏感快速,但操作不當(dāng)容易出現(xiàn)假陽性和假陰性的結(jié)果。具有檢出率高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn),檢測時間也較短(4-6h)。 高敏熒光免疫層析法,該方法借鑒膠體金的原理,以標(biāo)記了熒光微球的抗原(抗體)與樣本中抗體(抗原結(jié)合),再與硝酸纖維素膜上的抗原(抗體)結(jié)合,用特定機(jī)器測試熒光強(qiáng)度,從而實現(xiàn)定量,該方法具有膠體金的快速,Elisa的準(zhǔn)確率,與Idexx符合率在90%以上,是一種非常有發(fā)展前景的檢測方法。 檢測原理 Wellray®豬瘟病毒抗體定量檢測試劑盒以雙抗原夾心法為基礎(chǔ),采用微瑞高敏熒光層析技術(shù)快速定量測定樣本中豬瘟病毒抗體的含量。充分層析后的檢測卡經(jīng)WellRay®WR-1608熒光儀檢測,通過預(yù)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線自動計算出樣本中豬瘟病毒抗體的含量。 定量檢測抗體水平阻斷率評估值(0~*),檢測結(jié)果大于40%(含)時抗體保護(hù)水平為陽性,小于40%時抗體保護(hù)水平為陰性; 定量檢測抗體中和抗體效價(1~10000效價):當(dāng)樣本檢測結(jié)果,效價大于32(含)時抗體有保護(hù),小于32時抗體不保護(hù),檢測效價與豬瘟抗體含量成正比。 1 對血清中的豬瘟病毒抗體進(jìn)行快速準(zhǔn)確定量檢測。 2 高低端中和抗體濃度均可準(zhǔn)確定量。 3 與Idexx阻斷率比對結(jié)果符合率在90%以上。 效價定量原理 試劑盒將被檢血清滴加入高敏納米熒光層析試紙條,通過免疫層析15分鐘后,用熒光儀檢測T線和C線的熒光信號,通過軟件將T/C值代入內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線,軟件自動計算檢測得出具體的豬瘟抗體效價。該效價值代表了用陰性血清對半稀釋陽性血清至抗體效價下降至50%抗體保護(hù)時所需的稀釋倍數(shù)。對于這種評價方式,成都微瑞給出的參考陰陽性臨界點(diǎn)為1:32,50對應(yīng)的是IDEXX試劑盒30%的阻斷率,檢測結(jié)果32以下為陰性,32以上為陽性。 |